在現代生物醫藥領域，色譜純化技術是重組蛋白、抗體分選的核心手段。純化填料作為分離過程的關鍵介質，其性能直接影響分離效率、產物純度及批次間穩定性。選錯填料可能導致實驗失敗、工藝不穩定，甚至影響最終產品質量。

西寶生物深耕色譜填料領域多年，憑借質量工藝、嚴格的控制體系及豐富的應用經驗，為客戶提供高性能、高穩定性、高適配性的純化填料解決方案，助力研發與生產高效推進，避免因填料選型不當導致的翻車風險。

硅膠色譜填料是色譜分離技術中常用的固定相材料，其基質為高純度多孔球形或無定形二氧化硅（SiO?）。該填料具有多項顯著特點：機械強度高，能夠耐受高壓，因此適用于高效液相色譜（HPLC）和超高效液相色譜（UHPLC）；孔徑可控，范圍在 60?~300? 之間；比表面積較大，通常為 100-800 m2/g；表面富含硅羥基（SiOH），這一特性使其可以進行化學修飾，從而衍生出不同類型的硅膠色譜填料。其通用應用范圍廣泛，可用于小分子藥物、天然產物、環境污染物、食品添加劑等的分離分析。

正相硅膠在表面性質上，呈現為裸露硅膠或弱極性鍵合相，其極性大于樣品。在洗脫順序方面，極性小的組分先出峰，這與反相硅膠的洗脫順序相反。在溶劑上，兼容正己烷、氯仿等非極性溶劑。

應用場景主要包括：幾何異構體（如順反式脂肪酸）的分離；手性化合物拆分；脂溶性天然產物（如甾體、萜類）的分析等。

反相硅膠中，C18 是最常見的類型，其疏水性隨碳鏈增長而增強。洗脫順序為極性大的組分先出峰。該類型硅膠具有高重現性，是成熟的方法開發平臺，在 HPLC 應用中占比超過 70%。不過，它也存在局限性，在強堿性條件（pH>8）下硅膠易溶解，且對強極性化合物的保留較弱。

應用方面，可用于藥物純度分析；生物樣本中代謝物檢測（如血清、尿液中的代謝物）；環境水樣中農藥殘留的檢測等。

HILIC 硅膠的表面鍵合有親水層（如酰胺），會形成表層水膜。其分離機制是化合物在水膜與流動相之間的分配作用以及靜電作用共同參與。在流動相要求上，需要高乙腈比例（60-95%），且需加入少量緩沖鹽。該類型硅膠的優勢在于對強極性化合物保留強，且與質譜兼容性好。

應用領域包括：糖類（如葡萄糖、寡糖）、核苷酸的分離分析；多肽和親水性藥物代謝物的檢測；尿液中極性毒素的分析等。

高特異性：填料表面鍵合有能與目標分子（配體）發生特異性、生物親和性或仿生相互作用的配基，這是其核心特性。

高選擇性：可從復雜混合物（如細胞裂解液、血清、發酵液）中一步高效純化目標分子，且純度通常較高。

溫和洗脫：一般采用溫和的競爭性洗脫條件（如改變 pH、離子強度，或加入競爭性小分子、配體類似物等），有助于保持目標生物分子的活性。

寬廣的 pH 耐受性，允許使用強酸性或強堿性條件進行在位清洗（CIP），可徹底去除緊密結合的雜質和沉淀物，延長填料壽命并減少批次間差異。

優異的化學穩定性，能耐受高濃度 NaOH（常用于 CIP）、有機溶劑及變性劑（如尿素、鹽酸胍），便于再生和消毒。

良好的生物相容性，尤其是聚甲基丙烯酸酯和改性多糖類聚合物，可減少非特異性吸附。

多樣的配基鍵合方式，聚合物表面易于進行多種化學修飾，可實現不同配基的穩定鍵合。

Protein A / Protein G ：能特異性結合抗體的 Fc 區域，是單克隆抗體（mAb）純化的金標準。

金屬螯合（IMAC）：鍵合 Ni2?、Cu2?、Zn2?、Co2?等金屬離子，可通過組氨酸標簽（His-tag）純化重組蛋白。

生物素 / 親和素（鏈霉親和素）：用于純化生物素化分子，或利用生物素 - 親和素系統進行分離。

肝素：可結合凝血因子、脂蛋白、DNA 結合蛋白、生長因子等。

抗原 / 抗體：能特異性結合對應的抗體或抗原。

分離原理：基于目標分子與填料表面帶相反電荷的功能基團（離子交換基團）之間的靜電相互作用。

高載量：相較于親和層析，通常具有更高的動態結合載量，適合捕獲和中等純化步驟。

分辨率可調：通過調節流動相的 pH（影響分子凈電荷）和離子強度（鹽濃度，可競爭抑制靜電作用）進行選擇性洗脫，實現精細分離。

成本效益：通常比親和填料便宜，且再生簡便。

更廣泛的 pH 耐受性，可在極端 pH 條件下運行和清洗（如高 pH NaOH 清洗），能有效去除頑固結合的雜質（如脂質、疏水蛋白、內毒素），提高清潔效率和使用壽命。

優異的化學穩定性，耐受高濃度鹽溶液、變性劑、清潔劑和有機溶劑。

多樣的官能團選擇，可鍵合多種強 / 弱陰離子和陽離子交換基團。

生物分子的初步捕獲和中等純化，如蛋白質、肽、核酸（DNA、RNA）、病毒、質粒、抗生素等。

脫鹽和緩沖液置換：利用離子交換柱在低鹽條件下結合目標物，用高鹽洗脫雜質（鹽離子），再洗脫目標物，實現快速脫鹽或更換緩沖液。

分離電荷異構體，如不同磷酸化或糖基化狀態的蛋白質。

去除雜質：陰離子交換常用于去除 DNA、內毒素（帶負電）、部分帶負電的宿主細胞蛋白；陽離子交換常用于去除部分帶正電的宿主細胞蛋白、聚集物。

濃縮樣品：在低離子強度下，目標物結合到柱上后，可用小體積高鹽溶液洗脫實現濃縮。

生物制藥工藝流程：如抗體純化工藝中的精純步驟（去除聚集體、電荷變體、HCP、殘留 Protein A），以及疫苗、胰島素、生長因子等產品的純化。

西寶純化介質在性能上展現出多方面的核心優勢，具體如下：

高動態載量：單分散介質呈現更陡峭的動態吸附穿透曲線，在同等穿透點條件下，可實現更高的實際吸附載量。

高分辨率洗脫：洗脫峰型更高、更窄，分離度顯著提升，洗脫過程高度集中。這不僅提高了目標產物的濃度，同時減少了洗脫體積，極大簡化了后續濃縮步驟，提升整體生產效率。

低反壓與高流速：單分散結構有效降低了篩板堵塞風險，并允許使用更大孔徑篩板。這使得系統操作壓力更低、流速更快、結果重復性更佳，直接驅動生產效率的提升。

延長的使用壽命：單分散顆粒表面受力均勻分布，顯著提高了機械強度和穩定性，有效抵抗破碎，從而擁有更長的使用壽命。

卓越的批次間一致性：單分散特性確保裝填形成的色譜柱柱床結構高度均一穩定，保證了不同批次間工藝結果的優異重復性。

詳詢西寶生物產品，請咨詢：400-021-8158 / 021-50272975。